抗壞血酸氧化酶
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抗壞血酸氧化酶
在這種酶催化下,分子態(tài)的氧可將抗壞血酸氧化成去氫抗壞血酸,它存在于細(xì)胞溶膠和細(xì)胞壁中,酶中含銅。
抗壞血酸氧化酶是一種含銅的酶,位于細(xì)胞質(zhì)中或與細(xì)胞壁結(jié)合,與其它氧化還原反應(yīng)相偶聯(lián)起到末端氧化酶的作用,能催化抗壞血酸的氧化,具有抗衰老等作用,在植物體內(nèi)的物質(zhì)代謝中具有重要的作用。丙酮酸、異檸檬酸、a.酮戊二酸、蘋果酸、葡萄糖、6.磷酸、6.磷酸葡萄糖酸都可以在脫氫酶的作用下脫去H質(zhì)子,把H質(zhì)子轉(zhuǎn)移給輔酶,然后再經(jīng)過谷光甘肽把H質(zhì)子傳遞給抗壞血酸,在抗壞血酸氧化酶的作用下,抗壞血酸被氧化脫H,H與氧結(jié)合生成水。
1 抗壞血酸氧化酶活性常用的測定方法酶活性以酶活單位(酶活單位為lmin氧化1 g還原性抗壞血酸的酶量)表示,即酶活單位/g鮮重。常用的測定方法是碘量法,這是一種經(jīng)典的方法,所用儀器簡單,準(zhǔn)確性高;二是分光光度法,這種方法靈敏度和準(zhǔn)確性高,重演性好,用途廣,選擇性好;三是氧電極分析法,該法靈敏度高,準(zhǔn)確性好,但是氧電極對溫度變化非常敏感,測定時需要維持溫度恒定;四是脈沖極譜法,此種方法操作簡單,重演性好,與碘量法結(jié)果相一致。
在pH值為5-7范圍內(nèi)抗壞血酸氧化酶表現(xiàn)較高活性,在pH為5時活性最強(qiáng)。
抗壞血酸氧化酶在溫度45℃以下時出現(xiàn)兩次活性高峰,50℃以上時出現(xiàn)一次高峰,溫度在
50℃以下時酶活性持續(xù)時間長,達(dá)40min,而且隨著溫度的升高,活性高峰會提前,當(dāng)溫度在55℃以上的時候,酶活性持續(xù)的時間很短,在60℃時候只有20min。
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