基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)/痰液檢查
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痰(sputum)是氣管、支氣管和肺泡分泌物的混合物。健康人痰量很少,當(dāng)不呼吸道粘膜和肺泡近刺激時(shí)痰量增加。在病理狀態(tài)下,人僅痰量增多,其性質(zhì)也發(fā)生變化。痰液檢查的目的為:①助診某些呼吸系統(tǒng)疾病,如支氣管哮喘、支氣管擴(kuò)張等;②確診某些呼吸系統(tǒng)疾病,如肺結(jié)核、肺癌、肺吸蟲病等;③觀察療效和預(yù)后判斷等。
一、標(biāo)本采集
留取痰標(biāo)本的方法有自然咯痰,氣管穿刺吸取、經(jīng)支氣管鏡抽取等。采二者操作復(fù)雜且有一定的痛苦,故仍發(fā)自然咯痰為主要留取方法:但痰液要求新鮮,尤其以做細(xì)胞學(xué)檢查者更為重要。留痰時(shí)患者先用清水漱口數(shù)次,然后用力咯出氣管深處痰,留于玻璃、塑料小杯內(nèi)或涂蠟的紙盒中。對(duì)于無痰或少痰患者可用經(jīng)45攝氏度加溫100g/L氯化鈉水溶液霧化吸入,促使痰液易于咯出;對(duì)小兒可輕壓腦骨柄上方,誘導(dǎo)咯痰?;鑼W(xué)患者可于清理口腔后用負(fù)壓吸引法吸取痰液。痰標(biāo)本必須立即送檢,以免細(xì)胞與細(xì)菌自溶破壞。但PCr 可出現(xiàn)假陽性結(jié)果,對(duì)其臨床應(yīng)用價(jià)值目前仍處于研究和觀察之中。測(cè)24小時(shí)痰量或觀察分層情況時(shí)應(yīng)將痰咯于無色廣口瓶中,并加石炭酸少許以防腐。
采集標(biāo)本時(shí)嚴(yán)防痰液污染容器外壁,用過的標(biāo)本需滅菌后再行處理。
二、一般性狀檢查
1.量 排痰量以毫升/24小時(shí)計(jì),健康人一般無痰,患者的排痰量依病種和病情而異患者急性呼吸系統(tǒng)感染者較慢性炎癥時(shí)痰少;細(xì)菌性炎癥較病毒感染痰多;慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、空洞型肺結(jié)核和肺水腫患者痰量可顯著增多,甚至超過100毫升/24小時(shí)。
2.顏色及性狀:正常人偶有少量的白色或灰色粘液痰。病情況下可見:
(1)黃色膿性痰:其主要成分為膿細(xì)胞、提示呼吸道有化膿性感染,見于化膿性支氣管炎、金黃色葡萄球菌肺炎、支氣管擴(kuò)張、肺膿瘍等。肺膿瘍時(shí)可呈漿液膿性痰,放置后可分為四層:是層為泡沫和粘液,中層為漿液,下層為膿細(xì)胞,底層為暗色組織碎片等。患者患銅綠假單胞菌感染者可有綠色膿痰。
(2)紅色或棕紅色痰:系因呼吸道有出血,痰中含血液成分所致可見于倆癌、倆結(jié)核、支氣管擴(kuò)張等疾病。
(3)鐵銹色痰:乃因痰中所含有血紅蛋白變性所致可見于大葉倆炎、肺梗死等。
(4)粉紅色漿液泡沫痰:是由于肺淤血,局部毛細(xì)血管通透性增加所致見于左心功能不全肺水腫患者。
(5)爛桃樣痰:見于肺吸蟲病引起肺組織壞死分解時(shí)。
(6)棕褐色痰:見于阿米巴性肺膿瘍、慢性充血性心脘病肺淤血時(shí)。
(7)大量吸入煤碳粉法或長(zhǎng)期吸煙者可見灰黑色痰。
3.氣味:正常人新咳出的少量的痰液無氣味。血性痰可帶血腥氣味。肺膿腫、支氣管擴(kuò)張合并感染患者的痰液常有惡臭。晚期肺癌患者的痰液可有特殊臭味。膈下膿腫與肺溝通時(shí)患者的痰液可有糞臭味。
4.其他
(1)支氣管管型(bronchial cast):是纖維蛋折、粘液和白細(xì)胞等在支氣管內(nèi)凝集聚而成的樹枝狀物,呈灰白色或棕紅色含血紅蛋白。其直徑與形成部位的支氣管內(nèi)徑相關(guān),一般較短,亦有長(zhǎng)達(dá)15厘米的。在剛咳出的痰液中常卷曲成團(tuán),放入生理鹽水中后即可展開,呈現(xiàn)典型的樹枝狀。見于纖維蛋白性支氣管炎、肺炎鏈球菌性肺炎和累及支乞管的白喉患者。
(2)干酪樣小塊(cheesy masses)是肺組織壞死的崩解產(chǎn)生,形似干酪或豆腐渣,多見于胴結(jié)核患者痰中。取干酪樣小塊用作涂片檢查結(jié)核分支桿菌時(shí)陽性率較高。
(3)硫碘樣顆注(sulful-like geanule)是放線菌的菌絲團(tuán),呈淡黃色或灰白色,形似硫磺粗枝大葉粒,約粟粒大小,鼗其壓片鏡檢可見密集的菌絲呈放狀排列,狀若菊花。革蘭氏染色陽性,腓進(jìn)一步培養(yǎng)鑒定。
(4)肺石(lung calculus)為淡黃色或白煞費(fèi)苦心的碳酯鈣或磷酸鈣結(jié)石小塊。表面不規(guī)則。呈丘狀突起??赡転榉谓Y(jié)核干酪樣物質(zhì)的鈣化產(chǎn)生,亦可由侵入肺內(nèi)的異物鈣化而成。
(5)庫施曼螺旋體(Curschmann spiral)為淡黃色或灰白色富有彈性的絲狀物,常卷曲成團(tuán)。展開后呈螺旋狀。在低倍顯微鏡下所見為一扭成繩狀的粘液絲,中央貫穿一無色發(fā)亮的致密纖維,周圍繞發(fā)柔軟的絲狀物,該螺旋狀物系小支氣管分泌的粘液,因呼吸困難,肺內(nèi)二氧化碳張力增高而凝固,受到喘息氣流的間歇吹動(dòng)旋轉(zhuǎn)滾動(dòng)而成。見于支氣管哮喘和某些慢性支氣管炎患者的痰中。
(6)寄生蟲:有時(shí)于痰內(nèi)可檢出寄生蟲,如衛(wèi)氏并殖吸蟲、蛔呦和鉤蚴等,須用顯微鏡進(jìn)一步確認(rèn)。
三、顯微鏡檢查
1.非染色標(biāo)本
(1)紅細(xì)胞:正常人的痰淫片中查不到紅細(xì)胞。膿性普中可見少量紅細(xì)胞。紅細(xì)胞破壞或不典型時(shí)可用隱血試驗(yàn)證祥。血性痰中可見大量紅細(xì)胞。
(2)白細(xì)胞:正常人的痰涂片中可查到少量白細(xì)胞中性粒細(xì)胞。呼吸系有細(xì)菌感染時(shí)痰中白細(xì)胞顯著增加,常成堆存在,多為膿細(xì)胞,于支氣管哮喘,過敏性支氣管炎、肺吸蟲病、熱帶嗜酸粒細(xì)胞增多癥患者痰中嗜酸粒細(xì)胞增多。
(3)上皮細(xì)胞:痰中常見的上皮細(xì)胞有:①鱗狀上皮細(xì)胞:是口腔、咽喉部脫落的上皮細(xì)胞,咳嗽痰時(shí)混入痰中。多為復(fù)層鱗狀上皮脫落的表層細(xì)胞。在急性喉炎和咽炎時(shí)可有大量鱗狀上皮細(xì)胞混入痰液;②柱狀上皮細(xì)胞來自氣管和支氣管,包括纖毛柱狀上皮和粘液柱門面上皮。正常人痰中極少見,在乞管和支氣管粘膜發(fā)炎或癌變時(shí)脫落較多;③肺泡壁上皮細(xì)胞由單層上皮構(gòu)成,含Ⅰ型肺泡細(xì)胞和Ⅱ型肺泡細(xì)胞。前者在光鏡下不易與鱗狀上皮細(xì)胞區(qū)別;后者呈圓形或立方形,二者需用染色涂片區(qū)別。政黨人痰中一般查不到肺泡上皮細(xì)胞,當(dāng)肺組織遭到嚴(yán)重破壞時(shí)可出現(xiàn)。
(4)肺泡巨噬細(xì)胞(pulmonary alveolar macrophage)存在于肺泡隔中,又稱隔細(xì)胞,是一種較大的圓形或卵圓形細(xì)胞,較紅細(xì)胞大3-6倍,含1-2個(gè)圓形細(xì)胞核,可通過肺泡壁進(jìn)入肺泡腔,吞噬煙法顆粒和其它異物,形成塵細(xì)胞或含碳酸細(xì)胞等,隨痰液排出體旬。最常見于炭末沉著癥患者痰中。若肺泡巨噬細(xì)胞吞噬了紅細(xì)胞,可將其破壞使血紅蛋白降解,分解出血紅素,再轉(zhuǎn)變?yōu)?a href="/w/%E5%90%AB%E9%93%81%E8%A1%80%E9%BB%84%E7%B4%A0" title="含鐵血黃素">含鐵血黃素,則稱這為含鐵血黃素細(xì)胞,又稱心功能不全細(xì)胞,可用普魯士藍(lán)反應(yīng)鑒別。含鐵血黃素細(xì)胞見于肺淤血。肺梗塞和肺出血患者的痰中,尤其多見于慢性肺出血如特發(fā)性肺含鐵血黃素沉著癥患者。
(5)癌細(xì)胞:若在非染色痰涂片中見到形態(tài)異常,難以認(rèn)別的細(xì)胞,應(yīng)進(jìn)行染色鑒別,并注意尋找癌細(xì)胞。
(6)彈性纖維(elastic fiber)為粗細(xì)無孔不入、細(xì)長(zhǎng)、彎曲、折光性強(qiáng)、輪廓清晰的絲條狀物,無色或呈微黃色,由小支氣管壁、肺泡壁或血利害等壞死組織脫落所形成,見于肺膿腫、肺癌等患者痰中。
(7)夏科-萊登結(jié)晶(Charcot-Leyden crystal)是兩端銳利的無色菱形結(jié)晶,折光性強(qiáng),大小不一。。常與嗜酸性粒細(xì)胞及庫施曼螺旋體共存,在嗜酸性粒細(xì)胞堆中易找見。新咳出的痰中往往查不到,稍放置后可大量出現(xiàn),可能是由嗜酸性粒細(xì)胞崩解而來。見于支氣管哮喘和肺吸蟲病患者痰中。
(8)脂肪滴和髓磷脂小體:二者形態(tài)相似,呈油滴狀,但較大的髓磷化小全常含有同心性或不規(guī)則的螺旋條紋。偶見于健康人清晨痰中,于慢性支氣管炎患者痰中易見。
(9)寄生蟲和蟲卵:①阿米巴:于阿米巴性肺膿腫或與肺貫通的阿米巴且膿腫患者痰中,可查到溶組織阿米巴滋養(yǎng)體;②卡氏肺孢子蟲:見于肺孢子蟲病患者痰中,但陽性率不高;③細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴:當(dāng)肺內(nèi)寄生蟲棘球蚴囊破裂時(shí),患者痰中可檢出原頭蚴和囊壁碎片;④衛(wèi)氏并殖吸蟲卵:肺吸蟲病患者痰,尤其是有膿血性痰時(shí),多能查到該蟲蟲卵。也可用富集法查蟲卵。
2.染色標(biāo)本:痰涂片染色后能更清楚地顯示細(xì)胞結(jié)構(gòu),有利識(shí)別和分類,臨床應(yīng)用價(jià)值較大??捎肏E或巴氏染色檢查癌細(xì)胞,瑞特染色檢查白細(xì)胞,革蘭氏染色或抗酸染色檢查細(xì)菌等。
四、免疫學(xué)檢查
痰中的SIGA為呼吸道上皮組織所分泌,具有防御病原微生物侵襲的作用。正常休痰液中SIGA為(2..03±0.21)mg.L,SIGA減少時(shí),粘膜抵抗力下降,易患呼吸道感染;經(jīng)有效治療后,免疫功能改善,痰中SIGA可回升。支氣管哮喘和過敏性肺炎患者,痰中SIGE可增多。
五、微生物學(xué)檢查
痰中的微生物種類較多,在部分的是咳痰量混入的上呼吸道正常菌群。當(dāng)支氣管與肺部有感染時(shí),可于痰中出現(xiàn)相應(yīng)在的病原菌,如金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌、結(jié)核分桿菌等??扇√底魍科旧珯z查,最常用的是革蘭氏當(dāng)。還可進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)有致病生長(zhǎng)時(shí)需作藥物敏感試驗(yàn),對(duì)選擇敏感的抗菌藥物有幫助。
當(dāng)懷疑結(jié)核感染時(shí)可采用:①抗酸染色;②金胺O染色;金胺O為熒光染料,可使結(jié)核分支桿菌著色,較經(jīng)曲的抗酸染色陽性率高;③結(jié)核分支桿菌富集試驗(yàn),是采用沉淀或漂浮法,使痰中結(jié)核分枝桿菌富集后粉筆片染色檢查,陽性率較直接涂片法高。
如懷疑為支原體肺炎時(shí),可于痰粉筆片進(jìn)行直接或間接熒光抗體染色檢查,有助于早期診斷。
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