醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)/等位基因的特異寡核苷酸探針診斷法

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醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)基礎(chǔ)

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當(dāng)基因突變部位和性質(zhì)已完全明了時(shí),可以合成等基因特異的寡核苷酸探針(allele-specific oligonucleotide,ASO)用同位素或非同位素標(biāo)記進(jìn)行診斷。探針通常為長(zhǎng)20bp左右的核苷酸。用于探測(cè)點(diǎn)突變時(shí)一般需要合成兩種探針,一種與正?;蛐蛄型耆恢?,能與之穩(wěn)定地雜交,但不能與突變基因序列雜交;另一種與突變基因序列一致,能與突變基因序列穩(wěn)定雜交,但不能與正?;蛐蛄蟹€(wěn)定雜交,這樣,就可以把只有一個(gè)堿基發(fā)生了突變的基因區(qū)別開來(lái).

PCR可結(jié)合ASO,即PCR-ASO技術(shù),即先將含有突變點(diǎn)的基因有關(guān)片段進(jìn)行體外擴(kuò)增,然后再與ASO探針作點(diǎn)雜交,這樣大大簡(jiǎn)化了方法,節(jié)約了時(shí)間,而且只要極少量的基因組DNA就可進(jìn)行。

32 擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性 | 單鏈構(gòu)象多態(tài)性診斷法 32
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